“蛋白密语”：DIA 蛋白组学产品开启微观宇宙新篇

2025-08-13 14:18 24 斯坦德检测

目前，DIA 技术作为蛋白质组学定量技术的主流之选，其运用独特的 Data Independent Acquisition（数据非依赖采集）技术来采集数据。相较于传统的数据依赖扫描模式（DDA），DIA 方法展现出卓越的特性。它拥有更出色的重复性，能确保实验结果的稳定与可靠；具备更高的蛋白覆盖率，如同编织了一张更为细密的网，捕捉更多蛋白质信息；还拥有令人称赞的定量准确度。也正因如此，在诸如标志物研究、疾病精准分型以及品系比较等需要大规模样本分析的领域中，DIA 成为了科研人员优先考量的前沿技术‌。

产品定义

DIA 技术是目前主流的蛋白质组学定量技术，它采用DIA（Data Independent Acquisition，数据非依赖采集）技术进行数据采集，将整个质谱扫描质量范围分为若干小窗口，依次对每个窗口的所有离子进行碎裂，使其能够对扫描区间内的所有肽段离子进行高速一级 MS 扫描再进行二级 MS/MS 分析。因此，DIA 能够对复杂样品中几乎所有可检测的分子进行定量测定。 DIA 综合了 shotgun proteomics 高通量检测的特点与精准定量分析的优势，是真正意义上的全扫描质谱检测手段。

技术路线

DIA先提取样品中总蛋白，取出一部分做蛋白浓度测定及 SDS-PAGE 检测，另取部分进行胰蛋白酶酶解，对酶解肽段除盐之后，对样品进行 LC-MS/MS 鉴定。LC-MS/MS 鉴定分为两个主要步骤，第一步采用传统的 DDA 方法建立蛋白谱图库或者直接使用软件搜库，第二步采用 DIA 技术采集每个样品的质谱数据，在 DDA 数据库的基础上进行谱图匹配、定量信息的提取以及后续统计分析等。

技术优势

与其它传统定量技术相比，DIA 技术具有非常明显的优势。

1）与 Label-free（非标记定量）技术相比：

Label-free 技术采用的是 DDA 数据采集模式，因而其具有 DDA 固有的缺陷——低丰度蛋白鉴定重复性差，Cycle Time 变化大等；而且 Label-free 采用 MS1 质谱信息进行蛋白质定量，易受基质干扰，定量结果准确性较差。

2）与 ITRAQ/TMT 技术相比：

ITRAQ/TMT技术采用的也是 DDA 数据采集模式，同样具有 DDA 固有的缺陷；同时 ITRAQ/TMT 技术在样本基质复杂时，易受到其他多肽的报告离子的干扰，导致定量结果存在比值压缩的缺点，定量结果准确性不高。

与数据依赖扫描模式（DDA）相比，DIA方法具有更好的重复性、更高的蛋白覆盖率和定量准确度，特别适用于大样本的研究‌。

应用领域

01药物研发‌

DIA技术可用于药物代谢动力学研究、药物靶点鉴定和药物剂量优化，提高药物研发效率和准确性‌。

02疾病研究‌

在癌症研究中，DIA技术可揭示肿瘤细胞的变化及其对治疗的响应，同时也可用于研究其他疾病的生物标志物和蛋白质相互作用网络‌。